これまで、早期乳児てんかん性脳症のStxbp1 +/-マウスモデルについて簡単にご紹介してきました。STXBP1 遺伝子 （シナプシン結合タンパク質1、シナプス前タンパク質Munc18-1をコード）の変異を有する患者は、様々な異なる診断（すなわち、てんかん性脳症、ドラベ症候群、大田原症候群、ウエスト症候群）を受ける可能性がありますが、いずれもてんかん、知的障害、および／または自閉症的特徴を呈します（Stamberger et al. 2016）。 STXBP1関連疾患は稀であるが、STXBP1は5番目に番目に 最も一般的な原因である。 の5番目に多い原因遺伝子である（Symonds et al. 2020）。。STXBP1患者に観察される症状は ヘテロ接合体欠損 において再現され、STXBP1ヘテロ接合性欠損に対する有効な前臨床研究マウスモデルであることが証明されている。  

スパイク波放電（SWDs） は、てんかん様神経活動の運動効果を伴う可能性のあるてんかん様活動の一形態である。患者と同様に、SWDsと運動効果の両方が、我々によって ワイヤレスEEG、 自由行動中のStxbp1 +/-マウスにおける によって検出される。したがって、 抗てんかん薬（AED） および 遺伝子標的化化合物の をStxbp1 +/-マウスモデルで評価できる。  

現在の研究では、シナプス伝達を調節するシナプス前タンパク質の変化がてんかん表現型を引き起こし、これがシナプス前作用を持つ化合物によって緩和され得ることが示唆されている（Kovačević et al. 2018）。一般的に処方される抗てんかん薬（AED）であるレベチラセタム（Levetiracetam）や レベチラセタム や ラモトリギン はシナプス前作用機序を有するため、シナプス前 Stxbp1 遺伝子変異に起因する疾患のマウスモデルにおいて、脳波異常の抑制を検証するための候補として容易に利用   

本研究では、Stxbp1マウスモデルにおいて、 レベチラセタム （ Kovačević ら、2018年および 内部データ) および ラモトリギン （下記内部データ） STXBP1患者における臨床応用と一致する結果である。 この知見は、新規抗てんかん薬の非臨床有効性試験における我々のSTXBP1モデルの適切性とトランスレーショナルな関連性をさらに裏付けるものである。  

FIGURE 2. The epilepsy-like phenotype in Stxbp1 +/- mice is suppressed with standard of care AEDs Levetiracetam and Lamotrigine. Average frequency of detected SWDs during 6 hours of video recording following administration of saline, Levetiracetam (50 mg/kg, i.p,) and Lamotrigine (50 mg/kg, i.p.) (**P<0.01 saline vs Levetiracetam; ***P<0.001 saline vs Lamotrigine).   

下図に示すように、Stxbp1 +/- マウスの安定したてんかん様表現型により、 数週間にわたるEEGデータの縦断的収集を 数週間にわたって。 このような研究デザインにより、 治療前のSWD活動を測定し、その後数週間経過した時点での 化合物の投与 または AAV注入後のEEG測定を可能とする。 当社の当社の施設内繁殖能力、バイオ技術的専門知識、柔軟な開始時期を組み合わせることで、遺伝子標的介入の有効性試験は生後1日目から開始可能です。  

図 図. Stxbp1 +/- マウス 年齢 から 16 週齢o 20 週 週 安定したてんかん-様 表現型. Stxbp1 +/- マウスにおける1時間あたりのSWD平均頻度（数週間にわたって評価） (平均値 ± SEM)。  

In addition, we consistently detect cognitive deficits in the Stxbp1 +/- mouse model, which are typically observed in patients with STXBP1 mutations. We have functionally characterized the Stxbp1 +/- mouse model and detect reproducible behavioural phenotypes across multiple behavioural readouts (for e.g. Fear Conditioning, Automated home-cage analysis, Barnes maze).   

研究完了後、Stxbp1 +/- マウスの脳 は 定期的に 採取される 病理組織学的 組織病理学的解析es 例として 例えば、 半定量的定量化 活性ニューロンの数をc-Fosを  

図 4. c-Fos 発現。 c-Fos陽性ニューロンの 前頭前野、一次運動野、体性感覚野におけるc-Fos陽性ニューロンの代表的な免疫組織化学画像。 掲載者 Kovačević ら 2018年