Drug efficacy in vivo studies 

Bei InnoSer führen wir regelmäßig In-vivo-Wirksamkeitsstudien in einer Reihe präklinischer Modelle durch (von Patienten stammende Xenotransplantate, syngene Modelle, aus Zelllinien gewonnene Xenotransplantate), ergänzt durch Untersuchungen wie die Profilierung von Immunzellen und die Histopathologie. Klicken Sie auf die untenstehenden Links, um einige Beispiele für validierte Modelle wie das MC38-Kolorektalkarzinom-Modell oder das Modell der Peritonealkarzinomatose anzusehen .

Zur Beurteilung des Krankheitsverlaufs und der Wirksamkeit greifen wir häufig auf nicht-invasive In-vivo-Bildgebungsverfahren wie die Biolumineszenz-Bildgebung (klicken Sie hier, um Beispieldaten anzuzeigen) und/oder Ultraschall zurück (Abbildung 1).  

ABBILDUNG 1. Die orthotope Implantation von Renca-Zellen in die Niere ermöglicht die Untersuchung von Therapien gegen das Nierenzellkarzinom, was im Zusammenhang mit Immuntherapien von großer Bedeutung ist. (A) Nach anfänglicher Zellkultivierung wurden murineRENCA-Zellen bei unterschiedlichen Zelldichten (10.000, 50.000 und 100.000 Zellen)orthotop injiziert. Im Vergleich zu gesunden Nieren(B) wiesen die Nieren der Mäuse, denen mit Renca-Zellen injiziert wurden(C), wiesen eine Zunahme des gesamten Nierenvolumens und die Entstehung von Läsionen, die längsschnittlich abgebildet und quantifiziert werden können. ​

Um zusätzliche Einblicke in das TME zu gewinnen, Multiplex-Fluoreszenzfärbung (> 20 Marker) und Bildgebung können räumliche Informationen über die Interaktion zwischen Tumorzellen, Stromazellen und infiltrierenden Immunzellpopulationen liefern. Darüber hinaus ermöglichen Durchflusszytometrie- dies mirmuEinzelzell-Profiling sowohl isolierten Tumor & TME- sowie BlutBlut- oder Milz- Immunzell- Profilung.   

Drug efficacy in vitro studies 

Ihre In-vivo-Forschung im Bereich der Immunonkologie lässt sich gleichzeitig durch eine breite Palette von In-vitro-Kulturassays ergänzen (Immunzellprofilierung, Makrophagenpolarisierung, Zytokinfreisetzungsanalyse, T-Zell-Aktivierung/-Proliferation, B-Zell-Aktivierung/-Proliferation, Reifung dendritischer Zellen, Immunrisikobewertung usw.), die unter Verwendung von Primärzellen (aus PBMC gewonnen) oder menschlichen Zellliniendurchgeführt werden . Die Assays können in konventionellen 2D- oder 3D-(Ko-)Kulturen oder auf „Organ-on-Chip“-Plattformen durchgeführt werden.  

Ein Anwendungsbeispiel für den In-vitro-Assay zur Makrophagenpolarisation und die durch Immuntherapie induzierte Makrophagen-Toxizität ist dargestellt in Abbildung 2 dargestellt. Trametinib (Inhibitor von MEK1 und MEK2) verstärkt das M1-Profil von Makrophagen signifikant, beeinträchtigt jedoch im Vergleich zu unbehandelten Zellen auch deren Lebensfähigkeit, während der P13K-Inhibitor (LY294002) im Gegensatz zu Trametinib entgegengesetzte Wirkungen zeigt (Abbildung 2).  

ABBILDUNG 2. Die Polarisierung von Makrophagen kann in vitro untersucht werden, um den Wirkmechanismus (MoA) neuer Immuntherapien zu bewerten. Auswirkungen einer PI3K-Hemmung (LY294002) und einer MEK1/2-Hemmung (TRametinib) auf die Polarisierung von M1-Makrophagen: HLA-DR-Expression dargestellt als (A) Prozent (%) und (B) mittlere Fluoreszenz (MFI). Wirkung der PI3K-Hemmung (LY294002) und der MEK1/2-Hemmung (TRametinib) auf die Lebensfähigkeit von Makrophagen, die TRametinib-induzierte Immunotoxizität von M1-Zellen (C).  

Auswirkungen der Chemotherapie auf die kognitiven Fähigkeiten – „Chemo-Brain“ Bewertung 

Neben der Bewertung der Wirksamkeit neuartiger Krebsbehandlungen verfügen die Experten von InnoSer über Erfahrung bei der Beurteilung systemexterner Auswirkungen, wobei der Schwerpunkt insbesondere auf der Gesundheit des Gehirns und den kognitiven Funktionen liegt. Patienten, die sich einer Chemotherapie unterziehen, leiden häufig unter einer Verschlechterung der kognitiven Funktionen und des Gedächtnisses – was gemeinhin als „Chemo-Brain“.  

Ähnlich wie bei Krebspatienten geht die Verabreichung einer Chemotherapie bei Mäusen mit einer Verschlechterung der kognitiven Leistungsfähigkeit einher. Gemeinsam mit Forschern des Niederländischen Krebsinstituts (NKI) haben wir bereits zuvor gezeigt, dass die Verabreichung verschiedener zytotoxischer Chemotherapien unter Verwendung hochstandardisierten Verhaltenstests (Seigers et al., 2015).